产品详情
货号：3108
pH值范围：7.0-7.4
规格：100ml
有效期：5年
外观：液体
储存条件：-15～-25℃，避光
运输条件：常温
产品简介
无酶细胞消化液不含蛋白消化酶，但能使贴壁细胞与培养瓶皿表面有效脱离达到分离细胞的目的。与常规胰蛋白酶消化方法相比，无酶细胞消化液作用温和，不损伤和破坏细胞，不影响细胞生物学特性，是肿瘤细胞在体移植实验的最佳细胞脱壁方法。细胞用无酶消化液脱壁后，可直接进行传代培养或离心收集用于其它实验。由于未使用蛋白酶制剂，因此特别适于收集细胞进行膜蛋白、核蛋白和胞浆蛋白制备、Western Blot、免疫共沉淀实验，同时能避免样品蛋白降解，并避免蛋白酶制剂中的RNA酶对RNA的降解。
产品特点
1.室温孵育10分钟，具体消化时间不同细胞有所差别，贴壁细胞即可从瓶皿脱落，温和而有效；
2.脱壁的细胞可用于连续传代；
3.培养肿瘤细胞进行在体移植实验的最佳消化方法 ；
4.制备膜蛋白、胞核和胞浆蛋白、进行Western Blot、免疫共沉淀；
5.避免蛋白酶制剂中污染的 RNA 酶降解 RNA。
使用说明
1.用 PBS 洗涤单层培养细胞，尽可能完全去除瓶中液体；
2.加入适量无酶细胞消化液使其覆盖细胞表面，晃动瓶皿，使所有细胞均充分接触无酶消化液；
3.室温放置10分钟或适宜时间，偶尔晃动瓶皿，直到细胞完全脱壁。可加入细胞培养基或 2-3倍体积PBS缓冲液终止反应；脱壁后可能有成片细胞连在一起的现象，属于正常，如用作肿瘤移植，上述情况的产生可利于肿瘤细胞的生长。37℃时脱壁反应会加速；
4.400-500g离心5-10分钟，弃上清，收集细胞；
5.收集的细胞可用于：
(1)膜蛋白、胞核胞浆蛋白制备；配合百澳博Ripa buffer和蛋白酶cocktail抑制剂效果更佳。
(2) Western blot；
(3)免疫沉淀实验；
(4) DNA-蛋白结合实验；
(5)RNA提取；
(6)分瓶传代。
注意事项
1.尽量减少反复冻融的次数，以免失效；
2.在使用细胞消化液的过程中，要特别注意避免消化液被细菌污染；
3.细胞消化液消化细胞时间不宜过长，否则细胞铺板后生长状况会较差；
4.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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